Steriliseerimineon rakubioloogia ja biomeditsiiniliste eksperimentide nurgakivi. Enamik biomeditsiinilaboreid ei suudaks ilma steriliseeritud laboriinstrumentideta elusrakkude kultiveerimisega seotud tööd teha. Kuigi paljudel laboritel on mitteametlik suhe steriilsusega, on äärmiselt haruldane alahinnata steriilsete laboriinstrumentide mõju. Sellegipoolest on steriliseerimine sageli algtaseme laboritöötajate jaoks oluline ülesanne, nagu klaasnõude puhastamine.
Instrumentide nõrk steriliseerimisprotsess võib kaasa tuua suuremaid rahalisi kaotusi kui steriliseerimisseadmete täielik puudumine. Kui laborid kasutavad halvasti steriliseeritud seadmeid, võivad katsed kergesti saastuda, mille tulemuseks on kasutuskõlbmatute või ebatavaliste tulemuste tõttu kahju. Mõnel juhul võivad saastunud seadmed saastada teisi instrumente või riistvara, põhjustades laboris mitmeid katselisi tõrkeid, mida võib olla raske eraldada ja kõrvaldada. Nende ebapiisava steriliseerimise lõksude vältimine nõuab steriilsuse jälgimisel ranget ja tulemustele orienteeritud lähenemisviisi – tava, mille kasutuselevõtust võiks kasu olla paljudel laboritel.
Milliseid instrumente tuleb steriliseerida?
Steriliseerimine on iga rakukultuuritööd tegeva labori jaoks ülimalt oluline, nii et pole liialdus öelda, et kõik rakukultuuriga seotud laboriinstrumendid tuleb steriliseerida. Enamikul laboritel on palju riistvara ja isegi kui nad tegelevad rakukultuuriga, ei ole nad rakukultuuri tööga otseselt seotud. Oluline on see, et isegi rakukultuuriga mitteseotud seadmed võivad steriliseerimisest kasu saada – eeldades, et labor saab steriliseerimise kulusid endale lubada.
Näiteks laborites, mis teostavad rutiinselt geneetilist sekveneerimist või PCR-i, võib olla keeruline majanduslik ettepanek steriliseerida molekulaarbioloogia tööks vajalikke pipette ja termotsükleid. Kuna need seadmed ei osale rakukultuuris, on mitte täiesti steriilsed tagajärjed minimaalsed – vähemalt nii see on. Peamine on see, et see põhjendus on vale.
Kuigi on tõsi, et nende instrumentide bioloogiline saastumine ei põhjusta väga kallite rakukultuurikatsete surma pärast kokkupuudet valede mikroorganismidega, võib isegi ex vivo katsete tulemusi rikkuda ebaõige kokkupuude bioloogiliste materjalidega.
Steriliseerimine on oluline ettevaatusabinõu isegi labori riistvara puhul, mis pole kunagi otseselt ühegi bioloogilise materjaliga kokku puutunud. Näiteks bioohutuskapi sisemuse desinfitseerimisega saab labor tagada, et tema katsete tööruum ei muutuks saasteallikaks. Samuti tagab klaasnõude steriliseerimine, et neid saab kasutada tundlike katsete kõrval, kartmata tulemusi rikkuda.
Kõigil laboritel pole aga raha steriliseerida kõike, mis võib kasu saada. Steriliseerimine on sageli kallis, nii et enamik laboreid eelistab kriitiliste seadmete steriliseerimist, võimaldades samal ajal teistel rakukultuuri piirkonnast eemal asuvatel instrumentidel steriliseerimata jääda. Seetõttu on steriliseerimisressursside kataloogimine laboritöötajate jaoks hea harjumus, sest riistvarast, mida ei saa ilma steriliseerimiseta kasutada, on vähe kasu, kui enamikku muid laboris olevaid seadmeid ei steriliseerita järjestikku.
Mida laborid instrumendi steriliseerimise ajal vajavad
Steriliseerimisprotsessil on mitu erinevat etappi, millest igaüks nõuab laboris erinevat ruumi. Steriliseerimisprotsessi ruumiline keerukus sõltub sellest, kas laboris tehakse uurimistööd, kliinilist tööd või tootmist. Tootmisel ja kliinilisel tööl on kõrgemad steriilsusstandardid kui uurimistööl, mistõttu on steriliseerimisruumide eraldatus ja keerukus ilmsem. Lühidalt öeldes on steriliseerimiseks vajalikud kolm ruumi:
saastest puhastamise ala
pakendamisala
Steriliseerimispiirkond
Igal ruumil on erinev eesmärk, mis vastab steriliseerimisprotsessi etapile, mille eest see eluaseme eest vastutab. Dekontaminatsioonitsoon on koht, kus kehtestatakse steriilsuse alus, eemaldades võimalikult palju saasteaineid töötlemata meetoditega, nagu puhastamine mittesteriilse veega või puhastuskemikaalidega.
Kuna saastest puhastamine on sageli segane tegevus, eelistab enamik laboreid, et saastest puhastamise ruum oleks väljaspool labori peamist tööruumi. Dekontaminatsiooni eesmärk on eemaldada steriliseeritavalt instrumendilt või seadmelt kogu nähtav saaste. See võib hõlmata kõike alates mustuse tükkidest kuni puhastuskemikaalideni. On oluline, et saastest puhastamise protsess ei jätaks maha midagi, mida ei olnud enne protsessi algust. Seetõttu lõpeb enamik saastest puhastamise protsesse seadmete veega puhastamisega.
Pärast saastest puhastamist peab labor pakkima desinfitseeritavad seadmed nii, et riistvara funktsionaalsed pinnad saaksid puutuda kokku sterilisaatoriga, kuid mitte välisõhu või muu keskkonnaga, mis võib põhjustada uut saastumist.
Näiteks selleks, et autoklaavis tünni sisemuse steriliseerimiseks kuuma auruga steriliseerida, tuleks tünn "pakkida", asetades tünni suudme kohale lõdvalt fooliumitüki ja kleepides selle külgedele teibiga. Nii et autoklaavimisel Kui steriliseerija kuum aur steriliseerib ämbri, võib aur voolata fooliumi alla, steriliseerides ämbri funktsionaalse pinna (vedelikku hoidva sisemuse) ja seejärel välja voolata. Kuna foolium on silindri külge teibitud, jääb tünni funktsionaalne pind elementide eest kaitstuks ja steriilseks ka pärast tünni autoklaavist eemaldamist. Kliinilisi materjale käitlevate või ravimeid tootvate laborite puhul ulatub steriilse pakendamise standard aga palju kaugemale lihtsast fooliumist ämbrilahendusest.
Steriliseerimisala on steriliseerimisprotsessi süda. Sõltuvalt labori lähenemisviisist võib steriliseerimisalal kasutada ühte mitmest erinevast steriliseerimismeetodist. Need meetodid võivad hõlmata kuuma auru ja survet, näiteks standardses laboriautoklaavis, või eksootilisemaid meetodeid, näiteks gammakiirgust. Enamik laboreid järgib mis tahes steriliseerimismeetodit, mis nende rajatises on saadaval, mis tähendab, et enamiku ajast kasutatakse autoklaavi. Kuid ravimite või meditsiiniseadmete tootmisega tegelevate laborite puhul on kiiritamine tavalisem.
Steriliseerimisprotsessi valideerimine
Pärast steriliseerimise lõppu on enamikul laboritel üks mitmest meetodist, et kontrollida, kas nende seadmed on tõesti täielikult ja mitte ainult osaliselt steriliseeritud. Lihtsaim viis seda kontrollida on tagasihoidliku autoklaavilindiga. Kuigi see sobib ainult steriliseerimise kontrollimiseks autoklaavi kontekstis, on autoklaavilint tõhus, kuna see muutub steriliseerimistingimustega kokkupuutel aja jooksul, mis on vajalik täieliku steriliseerimise värvi tagamiseks. Seetõttu kasutavad paljud laborid steriliseerimise käigus laialdaselt autoklaaviteipi.
Keerulisem steriliseerimise valideerimine nõuab rakukultuuri katseid. Tüüpilise steriliseerimise kontrollimise katse puhul lastakse elujõulise bakterikultuuri proov läbi laboris kasutatava steriliseerimisprotsessi ja seejärel pühitakse kultuuri mahutit elujõuliste rakkude saamiseks. Seejärel kultiveeritakse tampooniproove mitu päeva ja vaadeldakse uusi rakukolooniaid. Kui kolooniaid ei kasva, on steriliseerimisprotsess edukas.
Steriliseerimistorustike abil saavutatakse tulemusi
Enne kui laborid saavad sellega seotud rakukultuuri riistvara edukalt steriliseerida, peavad neil olema sobivad tarvikud. Steriliseerimisprotsessis vajalike reaktiivide, puhastusvahendite ja ühekordselt kasutatavate vahendite suure hulga jälgimine võib olla keeruline, eriti laborites, kus pole pikka aseptilist tehnikat ega steriilset tootmist. Kõigi puhul alates autoklaavilindist kuni saaste eemaldamise etapi puhastuslahendusteni on koostöö kogenud tarnijaga eduka steriliseerimise ja katsetamise peamine tegur.
